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Discussione: PCR (Polymerase Chain Reaction), reazione a catena della polimerasi.

  1. #1
    Opinionista L'avatar di Lilia
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    PCR (Polymerase Chain Reaction), reazione a catena della polimerasi.

    PCR (Polymerase Chain Reaction), reazione a catena della polimerasi.

    Questa metodica fu inventata da Muller nel 1983,
    e per la PCR ebbe il Nobel per la chimica nel 1993.

    Con la PCR si amplifica iul DNA.
    Con ciò abbiamo studiato il DNA
    dell' HIV, certo sappiamo tutti che
    è un virus a RNA ma la cellula ha
    una trascrittasi inversa.
    Esistono determinati apparecchi,
    detti termociclatori, per eseguire la PCR.
    In breve essa consiste nell'amplificazione di pochi
    nucleotidi di DNA.

    Schematizzando queste sono le fasi:


    !) Denaturazione del DNA, ossia
    l'elica si deve aprire e si devono
    formare due filamenti.
    ( Temperatura 94°C).


    2) Uso dei primer (frammenti di mRNA)
    che sono degli inneschi senza i quali la
    polimerizzazione non avviene, essi
    delimitanoi 100 basi, ora vi sono le
    banche dei primer.
    L'appaiamento dei primer alla singola
    elica di DNA e' detta annealing
    ( Temperatura 55° C).


    3) Sufficiente quantità di nucleotidi
    in soluzione.


    4) Presenza di una DNA polimerasi,
    non è importante l'organismo da cui
    provenga, quella umana non va bene
    perchè alla temperatura di denaturazione
    della doppia elica del DNA (94° C)viene
    distrutta, e si usa, quindi, quella di un batterio
    termofilo, Taq DNA polimerasi ( Temperatura
    72° C).


    5) Un buffer (tampone)per mantenere costante il pH.


    Tutte queste sostanze vengono sciolte in solu-
    zione e inserite nel termociclatore dove il DNA
    viene amplificato 30-40 volte per sterminate
    applicazioni.

  2. #2
    Opinionista L'avatar di Vega
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    Tecnica elaborata da Kary Mullis, non Muller.

    È stato studiato ben più del DNA dell'HIV.

    Motivo della discussione?
    Pienamente funzionante e programmata in tecniche multiple

  3. #3
    Opinionista L'avatar di Lilia
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    Citazione Originariamente Scritto da Vega Visualizza Messaggio
    Tecnica elaborata da Kary Mullis, non Muller.

    È stato studiato ben più del DNA dell'HIV.

    Motivo della discussione?
    @
    Vega

    Sì, certo, è Mullis non Muller, un lapsus, era quello dell'LSD.
    Appunto l'ho detto nel rigo finale che la PCR venne utilizzata
    per sterminate applicazioni. e stop, per non mettere troppa
    carne al fuoco.

    Motivo della discussione, c'è un reparto scientifico dove
    non scrive nessuno a parte il povero Tiberio, che da un po' è
    scomparso, speriamo bene, e ho scritto io, se qualcuno è in
    grado di interagire ben venga. E' ora per me di partire per le vacanze sull'Aurelia,
    meglio oggi, che per il week end sarà tutta intasata, certo porterò il mio Apple.
    Ciao.

  4. #4
    Ultima modifica di restodelcarlino; 11-07-2019 alle 16:32

  5. #5
    Opinionista L'avatar di Vega
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    Serve a tante cose sequenziare il DNA. Molto serve anche per quanto riguarda il DNA antico, che si tratti di evoluzione, stabilire migrazioni nel passato, patologie, relazioni parentali in sepolture.
    Pienamente funzionante e programmata in tecniche multiple

  6. #6
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    Citazione Originariamente Scritto da restodelcarlino Visualizza Messaggio
    @ RdC.

    Nelprimo pomeriggio ho letto di corsa il tuo messaggio,
    era carino con la storia della borsa di "Lilia Poppins"...
    , ora sono tornata a casa e vedo solo un ok. Perchè?
    Mah.
    Come vuoi.

  7. #7
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    Citazione Originariamente Scritto da Vega Visualizza Messaggio
    Serve a tante cose sequenziare il DNA. Molto serve anche per quanto riguarda il DNA antico, che si tratti di evoluzione, stabilire migrazioni nel passato, patologie, relazioni parentali in sepolture.
    @ Vega.

    Sì, è vero con la PCR abbiamo sequenziato il DNA antico, ci ha lavorato
    soprattutto ilprof. Luca Luigi Cavalli Sforza che da poco ci ha lasciato.
    Sequenziare un DNA di 3 milioni di anni fa, dopo averlo estratto, è impressio-
    nante.

  8. #8
    So gerda, no ierda L'avatar di Jerda
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    Müller quello dell'LSD?
    forse dell'album lsd, altrimenti è Hofmann
    Refusi a catena
    Hither and thither,
    Hither and yon

  9. #9
    Opinionista L'avatar di Lilia
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    Citazione Originariamente Scritto da Jerda Visualizza Messaggio
    Müller quello dell'LSD?
    forse dell'album lsd, altrimenti è Hofmann
    Refusi a catena
    Se c'avevi da dì solo questo te potevi stà zitto. E levate.

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